液质联用HPLC-MS混合蛋白鉴定

简介

高效液相色谱-质谱联用技术（HPLC-MS-MS）以液相色谱作为分离技术，质谱作为检测系统，利用色谱对复杂样品的分离能力与质谱的高灵敏度和提供相对分子质量与结构信息的特点，将色谱与质谱的优势相结合，对混合蛋白进行鉴定的技术。Q Exactive LC-MS/MS将高性能的四级杆的母离子选择性与高分辨率的准确质量数（HR/AM）Orbitrap检测技术相结合，具有快速扫描和多重检测的功能，可以进行蛋白和代谢物的定性定量分析，且比MALDI更适合分析蛋白质的翻译后修饰，以及筛选生物标志物以及定量蛋白质组学。

实验流程                  

技术优势

1.适合复杂样品的蛋白鉴定， 如对相互作用洗脱的蛋白混合液、蛋白复合体、多肽、胶条样本（即SDS-PAGE样本）、IP、co-IP、Pull-down等纯化溶液中等复杂样本进行蛋白鉴定。

2. 周期短，通量高

仪器平台

Thermo-Scientific Q Exactive

样品要求

1. 双向凝胶胶点：考染、银染（质谱兼容）点清晰可见

2.SDS-PAGE条带：考染、银染（质谱兼容）点清晰可见

3.蛋白质溶液：蛋白总量>5μg，浓度>0.1μg/ul，缓冲液不含去污剂SDS、NP40，Triton X-100等