尼康常规共聚焦显微镜系统
尼康正置显微镜型号列表
Nikon C2+ 共聚焦显微镜系统
Nikon C2 +共聚焦显微镜是尼康共聚焦产品系列中的基本型号。C2 +被设计为实验室必不可少的显微镜工具，拥有强大的成像功能。高效的扫描头和探测器与尼康无与伦比的光学系统相结合，可提供出色的共聚焦图像。高速检流计扫描头的运行速度高达100 fps *，可以精确捕捉心肌的快速跳动。该系统还可在单次扫描中同时采集三个荧光通道和一个DIC通道。对于需要光谱成像功能的研究，除标准荧光检测器单元外，尼康C2si +系统还提供专用光谱检测器单元。C2si +系统支持高精度和高速32通道光谱成像或高灵敏度光谱成像。因其拥有令人难以置信的稳定性和操作的简便性，再加上卓越的光学技术，C2 +共聚焦系统是实验室必不可少的工具之一。
主要特性
高速采集高清图像
基于检流计的高速扫描可以对活细胞中的快速动态事件进行共聚焦成像，例如心肌细胞的跳动。在传统的共聚焦系统中，快速双向扫描可能导致像素移位。
然而，C2 +共聚焦系统的像素偏移校正机制确保即使使用快速双向扫描也能获得高质量的图像。
1、图像质量
尼康前所未有的物镜和经过时间验证的高效光学设计系统可在长工作距离内提供明亮和锐利的图像。
2、高效扫描头和探测器
紧凑的扫描头尺寸使C2 +可与各种尼康显微镜配合使用。C2 +采用高精度镜子和光学优质圆形针孔，并采用探测器与扫描头分离式设计以隔离热源和噪声源，以实现低噪声、高对比度和高质量的共聚焦成像。新开发的扫描头驱动系统和尼康独特的图像校正技术可实现8 fps（512 x 512像素）和100 fps（512 x 32像素）高速成像。
3、高性能物镜
CFI Apochromat Lambda S系列：这些高数值孔径（NA）物镜可在从紫外到红外的各种波长范围内提供色差校正，是多色共聚焦成像的理想选择。特别是，LWD Lambda S 40XC WI镜头具有极宽的色差校正范围，从405 nm到近红外。通过使用尼康独有的纳米水晶涂层技术，这些镜头的透射性能得到了增强。
CFI Apochromat LWD Lambda S 20XC WI, NA0.95
CFI Apochromat Lambda S 40XC WI, NA1.25
CFI Apochromat LWD Lambda S 40XC WI, NA1.15
CFI Apochromat Lambda S 60X Oil, NA1.49
4、CFI Apochromat TIRF系列
这些物镜拥有前所未有的1.49的数值孔径（使用标准盖玻片和浸油），是尼康物镜中的高分辨率拥有者。校正环可以针对不同的成像温度优化点扩散函数，无论您是在室温还是在37摄氏度下成像，都能确保高质量的共聚焦图像。
CFI Apochromat TIRF 60X Oil, NA1.49 (left)
CFI Apochromat TIRF 100X Oil, NA1.49 (right)
5、高清DIC图像
C2 +可同时获得三通道荧光图像，或三通道加透射DIC观察。高质量的DIC图像和荧光图像的叠加有助于用户进行形态分析。
DIC image Overlay of DIC and fluorescence images
6、直观的操作
NIS-Elements成像软件卓越的可操作性和多样化的分析能力既可以满足初学者，也可以满足经验丰富的共聚焦用户。此外，NIS-Elements不仅支持尼康显微镜的直观操作，也支持第三方外围设备的直观操作，以帮助用户进行更广泛的实验。多模能力：NIS-Elements成像软件的卓越可操作性和多样化分析功能可满足初学者和经验丰富的共聚焦用户的需求。此外，NIS-Elements不仅可以直观地操作尼康显微镜，还可以进行第三方外围设备的直观操作，以进行广泛的实验。拆分，NIS-Elements有许多针对光谱的分析和拆分功能可供用户使用，常用染料和荧光蛋白的光谱曲线都是预设好的。友好的显示界面使激光器、探测器等参数的设置变得很容易。扫描参数设置
7、快速准确的光谱成像：C2-DUS光谱探测器单元
高速光谱成像使用户可以在0.6秒内通过单次扫描获取32通道光谱图像（512 x 512像素）。此外，用户还能以24 fps的速度捕获512 x 32像素的图像。精确快速的拆分：精确的光谱拆分可在拆分紧密重叠的荧光光谱或者是消除自发荧光方面提供高性能。卓越的算法和高速数据处理可在图像采集过程中实现实时拆分。
488nm激光激发得到的光谱图像 荧光拆分，GFP以绿色表示，YFP以红色表示（右）
8、宽带光谱成像
用户可以使用四个激光器（从八个波长中选择）同时激发，从而实现更宽波段的光谱成像。虚拟滤波功能，通过从32个通道中选出与荧光探针谱线范围相匹配的通道并将他们进行组合，可以实现无滤光片滤波功能。
9、明亮的光谱成像：C2-DUVB GaAsP探测器单元
高灵敏度光谱图像采集搭配GaAsP PMT，C2-DUVB的发射带宽可调检测器，便可以更灵活的用更高的灵敏度来检测荧光信号。可变采集波长范围，用户自定义的发射波段可以收集选定波长范围内的图像，对固定带宽发射滤波器的需求不再变得必须。用户自定义发射带宽范围可以小到10nm。多标样品的光谱图像可以通过改变检测波长捕获一系列光谱图像来获得。
基于该应用，用户可在C2-DUVB上自由选择虚拟带通模式和连续带通模式。
用VB（可变带通）模式拍摄的3通道图像VB（可变带通）模式支持多达5通道彩色图像
CB（连续带通）支持最多32通道光谱成像
Nikon转盘式共聚焦系统(CSU)
Nikon定制多光子显微镜 AIR-MP
主要特性
1、超高灵敏度GaAsP NDD进行深处活体成像
GaAsP NDD配备的GaAsP PMT，与多碱性PMT相比，具有更高的信噪比和更高的灵敏度，可以对活体标本的更深区域进行清晰成像。它能够获取高信噪比的图像，实现更快的成像速度及更佳成像质量的Z-stack成像。其高灵敏度允许以较少的激光功率采集荧光信号，从而减少对活体标本的光损伤。尼康A1R MP +可以配置波长为1080 nm的激光器，也可配置波长为1300 nm的激光器并可实现高达1.4 mm的成像深度。NDD位于尽可能靠近样本的位置，以便检测活体样本深处最大散射信号。用于Ni-E / FN1正置显微镜的反射及透射GaAsP NDD组合允许通过检测反射与透射荧光信号来获取明亮和高信噪比的图像。
4通道反射GaAsP NDD检测器 4通道透射GaAsP NDD检测器
1300nm型GaAsP NDD探测器进行活体小鼠的深部脑组织成像
通过开颅对麻醉的YFP-H小鼠（4周龄）进行活体成像。可见完整V层锥体神经元和更深层的海马神经元。实现了海马树突的三维结构深层成像，最深可达1.4毫米。使用兼容1300 nm的反射GaAsP NDD和CFI75 Apochromat 25XC W 1300 物镜（NA 1.10，WD 2.0 mm）拍摄激发波长：1040nm照片来源：北海道大学电子科学研究所的川上龙之博士，Terumasa Hibi博士和Tomomi Nemoto博士
2、双波长红外激光同时激发成像
A1R HD MP +可配置双波长红外激光同时激发的系统该系统与双飞秒红外脉冲激光器结合，具有双波长同时输出（主可调输出为700 - 1300 nm，辅助固定输出为1040 nm），可同时激活并拍摄活体内深部区域的两种不同染料。
例1：双波长同时激发斑马鱼样品成像1 dpf斑马鱼转基因株系的三维图像，Tg [h2afv：GFP; EF1α：mCherry-zGem]。在抑制黑色素合成的苯基硫脲（PTU）处理后并繁殖后，用光学透明化溶液LUCID-A透明化整体样本。该转基因系分别使用mCherry（红色）和GFP（绿色）显现增殖细胞和染色质。
激发波长：900nm和1040nm
物镜：CFI75 Apochromat 25XC W 1300（NA 1.10，WD 2.0）
照片来源：冲绳科学技术研究生院发育神经生物学科的Toshiaki Mochizuki博士和Ichiro Masai博士
例：斑马鱼转基因株系Tg的侧视图[h2afv：GFP; EF1α：mCherry-CAAX]，34 hpf。在抑制黑色素合成的苯基硫脲（PTU）处理后繁殖后，用光学透明化溶液LUCID-A透明化整体样品。该转基因株系分别用mCherry（紫色）和GFP（绿色）标记细胞膜和染色质。SHG（蓝色）显示肌肉纤维。
激发波长：900 nm用于激发SHG和GFP，1040 nm用于激发mCherry
物镜：CFI75 Apochromat 25XC W 1300（NA 1.10，WD 2.0）
照片来源：冲绳科学技术研究生院发育神经生物学科的Toshiaki Mochizuki博士和Ichiro Masai博士
3、选配扫描头可实现高速度，高质量成像
A1R HD MP +是一款混合扫描头，包含高分辨率检流计（非共振）扫描振镜及超高速共振扫描振镜。其混合扫描头允许以超快的速度进行成像和光活化，以研究细胞动力学和相互作用。亦可选配只有检流计的型号（A1 MP +）。A1R HD MP +和A1 MP +均可配置1080 nm和1300 nm两种波长。HD共振扫描头进行超高速及高质量成像；720fps高速拍摄活体动态图像。
基本扫描参数
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1D 扫描 |
15,600 lps |
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2D扫描 |
720 fps (512 x 16 像素) |
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Full frame scanning |
60 fps (256 x 256 像素) |
A1R HD MP+共振扫描头具备7.8kHZ超高共振频率，可实现高达720fps（512x16像素）超高速度。尼康光学像素时钟生成系统在高速成像时亦可确保稳定的几何矫正及均匀的成像视场。此功能可成功展示活体中的高速变化，如活体器官反应、动态及细胞相互作用等。使用A1R MP+超高速共振扫描头飞秒脉冲红外激光激发活体器官血管血细胞，其运动以30fps（30ms）速度三个独立通道同步获取连续的荧光图像。三种荧光基团同时激发并成像---胞核（蓝）、内皮（绿）、血浆（红）。长波长高速激光结合超高速共振扫描可有效减少光毒性并使多光子分辨生物分子成为了可能。
上图为血管血细胞，图像分辨率: 512 x 512 像素,图像获取速度: 30 fps, 物镜: 水浸型物镜 60X
（照片来源: Dr. Satoshi Nishimura, Center for Molecular Medicine, Jichi Medical University）
上图为H系小鼠2mm脑片清晰结构大视野与图像细节对比
4、改变多光子激发波长进行自动激光对准
当多光子激发波长或群速度色散预补偿改变时，指向物镜后孔径的多光子激光束位置也可能发生改变，并导致图像上的强度不均，或引起红外与可见激光光路之间的轻微错位。传统上，验证红外激光束指向和设置对准是困难的。尼康A1R HD MP +的自动激光对准功能，安装在多光子激发光路的入射光单元中，只需在NIS-Elements C中点击即可自动对红外激光进行精确校准。(可在800 nm - 1300 nm波长范围内自动激光校准）
5、统一的图像采集及分析软件平台
尼康的统一软件平台NIS-Elements为多光子成像提供直观的工作流程。结合JOBS和Illumination Sequence等图形化编程工具，可以完全定制全面的操作环境，满足任何级别的应用需求。
